鼠抗t2-毒素單克隆抗體是由多種鐮刀菌產(chǎn)生的一種霉菌毒素。主要污染小麥、大麥、玉米等糧食作物及其制品，對人類健康及畜牧業(yè)構(gòu)成了較大危害。t2-毒素主要影響血液，肝臟，腎臟，胰腺肌肉及淋巴細(xì)胞的功能，t2-毒素中毒后的一般臨床癥狀為厭食、嘔吐、腹瀉、生長停滯、繁殖和神經(jīng)機(jī)能障礙等。該抗體可運(yùn)用于elisa、膠體金、免疫親和柱層析等免疫檢測。鼠抗t2-毒素單克隆抗體的常見問題：
1.包被抗體或抗原不適，易產(chǎn)生陽性值較小，或產(chǎn)生變異，即跳管現(xiàn)象。
2.用抗血清不純化，或純化程度太低的抗體包被，則陽性值較小，或沒有陽性梯度。
3.封閉不好或標(biāo)記物過濃可產(chǎn)生對照值較高。
制備并鑒定抗t-2毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株，以期為t-2毒素的快速檢測提供有力的抗體工具。方法：采用琥珀酸酐法將t-2毒素活化為t-2hs,t-2hs在dcc與nhs作用下與牛血清白蛋白(bsa)或卵清白蛋白(ova)偶聯(lián)合成*抗原。以t-2hs-bsa為抗原，免疫balb/c小鼠，用elisa篩選、建立分泌抗t-2毒素抗體的雜交瘤細(xì)胞株。測定單抗免疫球蛋白亞類及單抗效價，用間接競爭法檢測單克隆抗體細(xì)胞株的特異性。結(jié)果：建立了1株穩(wěn)定分泌抗t-2毒素抗體的雜交瘤細(xì)胞株t-1b3，該細(xì)胞株所分泌的單隆抗體ig亞類為igg1，elisa檢測結(jié)果表明抗t-2毒素抗體可以與t-2毒素發(fā)生特異性反應(yīng)，工作濃度為1:6.5×104,ic50為3.6ng/ml。該抗體與ht-2毒素的交叉反應(yīng)為65.9%,與黃曲霉毒素?zé)o交叉。結(jié)論：制備出能分泌具有較高特異性和親和力的抗t-2毒素單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。

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