薄層色譜法的操作方法
薄層色譜法是用于分離混合物的層析技術(shù)，利用覆蓋了很薄一層吸附劑的玻璃板、塑料片或鋁箔上進(jìn)行混合物的分離。薄層色譜法操作簡(jiǎn)單，是一種常用的色譜分離方法，下面就簡(jiǎn)單介紹一下薄層色譜法的操作方法
1.薄層板：
有市售薄層板(普通或高效板)和自制薄層板，可根據(jù)需要選用。
2.點(diǎn)樣：
通常在潔凈干燥的環(huán)境，用毛細(xì)管或配合相應(yīng)的半自動(dòng)或自動(dòng)點(diǎn)樣器械將樣品點(diǎn)樣于薄層板上。一般為圓點(diǎn)狀或窄細(xì)的條帶狀，點(diǎn)樣基線(xiàn)距底邊10-15mm，高效板一般基線(xiàn)距底邊8-10mm。圓點(diǎn)狀直徑一般不大3mm，高效板一般不大于2mm。接觸點(diǎn)樣時(shí)注意勿損傷薄層板表面。條帶狀寬度一般為5-i0mm，高效板條帶寬度一般為 4-8mm，可用半自動(dòng)或自動(dòng)點(diǎn)樣器械噴霧法點(diǎn)樣。點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以相鄰斑點(diǎn)互不干擾為宜，一般不少于8mm，高效板供試品間隔不少于5mm。
3.展開(kāi)
將點(diǎn)好供試品的薄層板放入展開(kāi)缸中，浸入展開(kāi)劑的深度為距原點(diǎn)5mm為宜，密閉。除另有規(guī)定外，一般上行展開(kāi)8-15cm，高效薄層板上行展開(kāi)5 -8cm。溶劑前沿達(dá)到規(guī)定的展距，取出薄層板，晾干，待檢測(cè)。
4.顯色與檢視
試品含有可見(jiàn)光下有顏色的成分可直接在日光下檢視，也可用噴霧法或浸漬法以適宜的顯色劑顯色或加熱顯色，在日光下檢視。有熒光的物質(zhì)或遇某些試劑可激發(fā)熒光的物質(zhì)可在365nm紫外光燈下觀察熒光色譜。對(duì)于可見(jiàn)光下無(wú)色，但在紫外光下有吸收的成分可用帶有熒光劑的硅膠板，在254nm紫外光燈下觀察熒光板面上的熒光猝滅物質(zhì)形成的色譜。
5.記錄
薄層色譜圖像一般可采用攝像設(shè)備拍攝，以光學(xué)照片或電子圖像的形式保存。也可用薄層掃描儀掃描記錄相應(yīng)的色譜圖。
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