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大鼠草酸(OA)ELISA試劑盒說明書

大鼠草酸(oa)elisa試劑盒說明書
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠草酸(oa)的含量。
l 有效期:6個(gè)月
l 保存條件:2-8℃
大鼠草酸(oa)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。 往預(yù)先包被大鼠草酸(oa)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、hrp標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物tmb顯色,tmb在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠草酸(oa)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(od 值),計(jì)算樣品濃度。
大鼠草酸(oa)elisa試劑盒樣本處理及要求
1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用edta或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°c 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。
需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
大鼠草酸(oa)elisa試劑盒問題解析:
1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。
2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理
3.洗板時(shí)容易造成誤差: 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹?,所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)
4.顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時(shí)間太長,都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候,要先查看顯色劑本身的情況
5.終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒
6.讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈
試劑準(zhǔn)備
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μl;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μl;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(hrp)標(biāo)記的檢測抗體100μl,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μl),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物a、b各50μl,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μl,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的od值。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的od值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的od值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。
試劑盒性能
1. 檢測范圍:3.75 ng/ml – 120 ng/ml。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 ng/ml。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
大鼠草酸(oa)elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品*:
ks16729 犬繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(mis/amh)elisa試劑盒 dog mullerian inhibiting substance / anti-mullerian hormone (mis / amh) elisa kit
ks16721 犬*(cortisol)elisa試劑盒 dog cortisol (cortisol) elisa kit
ks12596 大鼠p物質(zhì)(sp)elisa試劑盒 rat substance p (sp) elisa kit.
ks15519 人組織因子途徑抑制物2(tfpi2)elisa試劑盒 human tissue factor pathway inhibitor 2 (tfpi2) elisa kit
ks12491 人6酮前列腺素(6-k-pg)elisa試劑盒 6 people keto prostaglandin (6-k-pg) elisa kit
ks14426 人α1抗*(α1at)elisa試劑盒 human α1 antitrypsin (α1at) elisa kit
ks16210 貓白細(xì)胞介素10(il10)elisa試劑盒 cats interleukin 10 (il10) elisa kit
ks14168 人半乳糖凝集素3(galectin3)elisa試劑盒 human galectin 3 (galectin3) elisa kit
ks12951 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(mip-5)elisa試劑盒 human macrophage inflammatory protein 5 (mip-5) elisa kit
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