菌種活化培養(yǎng)基的配置
1）菌種試管斜面（活化）培養(yǎng)基及母種擴大培養(yǎng)基
馬鈴薯瓊脂糖培養(yǎng)基：馬鈴薯（去皮）200 g 、葡萄糖20 g、瓊脂15～20g、蒸餾水1000 ml ， ph自然。試驗用量為1/5。
① 稱量 取去皮馬鈴薯40g，葡萄糖兩份，每份2g，瓊脂1.5-2.0g。瓊脂加入的量取決于瓊脂的質(zhì)量，質(zhì)量差的應(yīng)適當增加。
② 將馬鈴薯切成小塊，放入鍋中，加水200ml，煮沸30 min。用雙層紗布濾去馬鈴薯殘渣，濾液加蒸餾水定容到200ml，攪拌均勻。
③ 取100ml濾液，裝入250ml的錐形瓶內(nèi)，加入2g葡萄糖，攪拌使糖溶解，然后加塞包扎，等待滅菌。該培養(yǎng)基即為酵母菌擴大培養(yǎng)的液體pda培養(yǎng)基。
④ 將剩余100ml馬鈴薯濾液放回鍋中，加入瓊脂，加熱熔化。在瓊脂熔化的過程中，需要用玻璃棒不斷攪拌，并控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦。
⑤ 加入2g葡萄糖，葡萄糖溶解后，加入適量的水以補充加熱過程中損失的水分，定容到100ml。
⑥ 分裝 將煮好的培養(yǎng)基分裝于試管中，其量為管高的1／5，滅菌后制成斜面。分裝三角瓶的容量以不超過三角瓶容積之一半為宜。
⑦ 加塞 在管口塞上棉塞。棉塞可過濾空氣，防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)。
⑧ 包扎 加塞后，將試管用線繩捆好，再在棉塞外包一層報紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道線繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱。
⑨ 滅菌 將上述培養(yǎng)基以0.1mpa，121℃，高壓蒸汽滅菌20 min。
⑩ 擱置斜面 將滅菌的試管培養(yǎng)基豎直放置，冷至50℃左右(以防斜面上冷凝水太多)，將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。
2）進行恒溫搖床培養(yǎng)的pda液體培養(yǎng)基
① 稱量 取去皮馬鈴薯180g，分別稱取葡萄糖1g、2g、3g各三份。
② 將馬鈴薯切成小塊，放入鍋中，加水900ml，煮沸30 min。用雙層紗布濾去馬鈴薯殘渣，濾液加蒸餾水定容到900ml，攪拌均勻。
③ 分裝 將煮好的培養(yǎng)基分裝于9個錐形瓶中，每支錐形瓶100ml培養(yǎng)基，編號（1）-（9），用記號筆注明置于恒溫搖床。
④ 加葡萄糖，利用1mol/l的氫氧化鈉溶液或1mol/l的鹽酸溶液按照下表調(diào)節(jié)ph ，并向?qū)?yīng)pda液體培養(yǎng)基（每瓶100ml）中加入相應(yīng)量的葡萄糖 。
⑤ 加塞 攪拌充分后，在瓶口塞上棉塞。棉塞可過濾空氣，防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)。
⑧ 包扎 加塞后，再在棉塞外包一層報紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道線繩扎好。
⑨ 滅菌 將上述培養(yǎng)基以0.1mpa，121℃，高壓蒸汽滅菌20 min，冷卻待用。
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① 稱量 取去皮馬鈴薯40g，葡萄糖兩份，每份2g，瓊脂1.5-2.0g。瓊脂加入的量取決于瓊脂的質(zhì)量，質(zhì)量差的應(yīng)適當增加。
② 將馬鈴薯切成小塊，放入鍋中，加水200ml，煮沸30 min。用雙層紗布濾去馬鈴薯殘渣，濾液加蒸餾水定容到200ml，攪拌均勻。
③ 取100ml濾液，裝入250ml的錐形瓶內(nèi)，加入2g葡萄糖，攪拌使糖溶解，然后加塞包扎，等待滅菌。該培養(yǎng)基即為酵母菌擴大培養(yǎng)的液體pda培養(yǎng)基。
④ 將剩余100ml馬鈴薯濾液放回鍋中，加入瓊脂，加熱熔化。在瓊脂熔化的過程中，需要用玻璃棒不斷攪拌，并控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦。
⑤ 加入2g葡萄糖，葡萄糖溶解后，加入適量的水以補充加熱過程中損失的水分，定容到100ml。
⑥ 分裝 將煮好的培養(yǎng)基分裝于試管中，其量為管高的1／5，滅菌后制成斜面。分裝三角瓶的容量以不超過三角瓶容積之一半為宜。
⑦ 加塞 在管口塞上棉塞。棉塞可過濾空氣，防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)。
⑧ 包扎 加塞后，將試管用線繩捆好，再在棉塞外包一層報紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道線繩扎好。用記號筆注明培養(yǎng)基名稱。
⑨ 滅菌 將上述培養(yǎng)基以0.1mpa，121℃，高壓蒸汽滅菌20 min。
⑩ 擱置斜面 將滅菌的試管培養(yǎng)基豎直放置，冷至50℃左右(以防斜面上冷凝水太多)，將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。
2）進行恒溫搖床培養(yǎng)的pda液體培養(yǎng)基
① 稱量 取去皮馬鈴薯180g，分別稱取葡萄糖1g、2g、3g各三份。
② 將馬鈴薯切成小塊，放入鍋中，加水900ml，煮沸30 min。用雙層紗布濾去馬鈴薯殘渣，濾液加蒸餾水定容到900ml，攪拌均勻。
③ 分裝 將煮好的培養(yǎng)基分裝于9個錐形瓶中，每支錐形瓶100ml培養(yǎng)基，編號（1）-（9），用記號筆注明置于恒溫搖床。
④ 加葡萄糖，利用1mol/l的氫氧化鈉溶液或1mol/l的鹽酸溶液按照下表調(diào)節(jié)ph ，并向?qū)?yīng)pda液體培養(yǎng)基（每瓶100ml）中加入相應(yīng)量的葡萄糖 。
⑤ 加塞 攪拌充分后，在瓶口塞上棉塞。棉塞可過濾空氣，防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)。
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