核酸標(biāo)記新貴---轉(zhuǎn)染*
哈嘍，艾瑞巴蒂！今天小編本著好物需要分享，來給大家介紹一款我們轉(zhuǎn)染*——一步法核酸標(biāo)記lable it。不需要構(gòu)建熒光表達(dá)載體就可監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)染效率，也可進(jìn)行體內(nèi)體外示蹤，是不是很方便。
label it®核酸標(biāo)記試劑盒為不同核酸類型提供高效、一步到位的直接標(biāo)記。采用非酶標(biāo)記方法和非破壞性的方式將標(biāo)記共價(jià)附著到核酸上，不會(huì)改變核酸的結(jié)構(gòu)或影響下游雜交性能，下游可以直接進(jìn)行體外體內(nèi)示蹤、生物素檢測(cè)、活細(xì)胞定位等。
一、標(biāo)記原理及步驟
label it®標(biāo)記試劑包含一種反應(yīng)性烷基化試劑，該試劑具有通過靜電相互作用促進(jìn)的強(qiáng)核酸結(jié)合能力。將rna或dna與lable it 在37℃混合孵育1h后純化即可獲得標(biāo)記完成的核酸，即可進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)。
圖.labie it 原理及實(shí)驗(yàn)步驟
label it®化學(xué)標(biāo)記試劑組成：
綠色區(qū)域：標(biāo)記（熒光團(tuán)或半抗原）
黃色區(qū)域：促進(jìn)與核酸靜電相互作用的接頭
藍(lán)色區(qū)域：反應(yīng)性的烷基化基團(tuán)
二、產(chǎn)品特點(diǎn)
無損標(biāo)記任何dna或rna模板，應(yīng)用廣泛
圖1、核酸的無損直接標(biāo)記。小鼠總rna用label it®cy®3（b）電泳標(biāo)記，并在agilent rna 6000 nano芯片上與未標(biāo)記的總rna（a）一起分析。標(biāo)記和未標(biāo)記樣品的rna完整性數(shù)（rin）約為9.0。
操作簡(jiǎn)單快速，僅需一個(gè)反應(yīng)步驟
可調(diào)標(biāo)記密度–通過最佳標(biāo)記的dna和rna實(shí)現(xiàn)高靈敏度
圖2、靈活的標(biāo)記反應(yīng)條件。通過調(diào)整反應(yīng)中l(wèi)abel it®試劑（mirus bio）的量或在37°c下調(diào)整標(biāo)記反應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間，可以輕松控制標(biāo)記密度。
化學(xué)標(biāo)記減少了酶標(biāo)整合和復(fù)制偏好
成本低，與核酸酶法標(biāo)記相比，每個(gè)反應(yīng)可節(jié)省50%的費(fèi)用
三、如何選擇標(biāo)記試劑盒
lable it 系列產(chǎn)品除了通用lable it核酸標(biāo)記試劑盒外，還有優(yōu)化的標(biāo)記試劑盒：label it® tracker™，用于不同類型核酸標(biāo)記。以及l(fā)able?it®核酸修飾試劑盒，主要利用胺官能團(tuán)修飾dna或rna。
圖3、標(biāo)記試劑盒種類
四、lable it 系列應(yīng)用案例
圖4、標(biāo)記質(zhì)粒dna的遞送及yfp報(bào)告基因表達(dá)。使用label it®核酸標(biāo)記試劑盒cx羅丹明（mirus bio）標(biāo)記的transit®-lt1（mirus生物）和eyfp nuc質(zhì)粒dna轉(zhuǎn)染cos-7細(xì)胞的共聚焦熒光顯微鏡。圖像顯示轉(zhuǎn)染羅丹明標(biāo)記的質(zhì)粒dna（紅色）和eyfp表達(dá)（黃色）8小時(shí)后的cos-7細(xì)胞。
圖5。質(zhì)粒定位和表達(dá)的間接示蹤。使用transit®-lt1（mirus bio）將label it®tracker -cy®5（mirus生物）標(biāo)記的peyfp nuc質(zhì)粒（藍(lán)色）轉(zhuǎn)染進(jìn)在wan全培養(yǎng)的cos-7細(xì)胞™中。在轉(zhuǎn)染后3、8和20小時(shí)采集圖像。藍(lán)色信號(hào)表示cy®5標(biāo)記質(zhì)粒的細(xì)胞定位，綠色信號(hào)表示細(xì)胞自發(fā)熒光，黃色信號(hào)表示核黃色熒光蛋白（yfp）報(bào)告子的表達(dá)。使用共焦顯微鏡獲取圖像。
圖6、c6細(xì)胞中的sirna追蹤。將c6膠質(zhì)瘤細(xì)胞接種在6孔板中的聚-d-賴氨酸涂層蓋玻片上并孵育過夜。將8µl transit -tko®轉(zhuǎn)染試劑稀釋在200µl無血清培養(yǎng)基和50 nm（孔中的最終濃度）label it®sirna tracker cytm3標(biāo)記的sirna雙鏈體添加到稀釋的transit -tko®轉(zhuǎn)染試劑中以形成復(fù)合物。隨后，將這些復(fù)合物添加到wan全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的45%融合的c6細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染后20小時(shí)在zeiss lsm 510共焦顯微鏡上獲得共焦圖像。
訂閱信息：
貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 規(guī)格
mir 3225 label it® nucleic acid labeling kit, fluorescein 標(biāo)記 25 µg 核酸
mir 3425 label it® nucleic acid labeling kit, biotin 標(biāo)記 25 µg 核酸
mir 3725 label it® nucleic acid labeling kit, cy®5 標(biāo)記 25 µg 核酸
mir 4125 label it® nucleic acid labeling kit, tm-rhodamine 標(biāo)記 25 µg 核酸
mir 3900 label it® nucleic acid modifying kit, amine 修飾 100 µg of 核酸
mir 7904 label it® plasmid delivery control, cy®3 10 µg
mir 7900 label it® rnai delivery control, cy®3 10 µg (0.75 nmol)
mir 7212 label it® sirna tracker™ intracellular localization kit, cy®3 標(biāo)記 50 µg sirna
mir 7214 label it® sirna tracker™ intracellular localization kit, cx-rhodamine 標(biāo)記 50 µg sirna
mir 7216 label it® sirna tracker™ intracellular localization kit, fluorescein 標(biāo)記 50 µg sirna
mir 7020 label it® tracker™ intracellular nucleic acid localization kit, cy®3 標(biāo)記 50-200 µg 質(zhì)粒dna
mir 7022 label it® tracker™ intracellular nucleic acid localization kit, cx-rhodamine 標(biāo)記 50-200 µg 質(zhì)粒dna
mir 7024 label it® tracker™ intracellular nucleic acid localization kit, biotin 標(biāo)記 50-200 µg 質(zhì)粒dna
mir 7025 label it® tracker™ intracellular nucleic acid localization kit, fluorescein 標(biāo)記 50-200 µg 質(zhì)粒dna
上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
試劑 | 耗材 | 儀器 | 軟件 | 定制 | 實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 供應(yīng)鏈
微信公眾平臺(tái)：優(yōu)寧維抗體專家，歡迎關(guān)注！
小優(yōu)博士（小程序）：5大課堂, 讓你的科研不再難！
恒奧德升級(jí)款多功能不銹鋼溶液過濾器
我國自主第三代核電 華龍一號(hào)海外首個(gè)工程兩臺(tái)機(jī)組全面建成投產(chǎn)
安裝氣體報(bào)警器可能遇到的問題
R+W9372-9864-0聯(lián)軸器
固緯GDS-3000A數(shù)字存儲(chǔ)示波器 2.5GSa/s 實(shí)時(shí)采樣率(雙通道)
核酸標(biāo)記新貴---轉(zhuǎn)染*
三點(diǎn)介紹德國賀德克HYDAC開關(guān)的常見種類
水浴恒溫振蕩器注意事項(xiàng)和維護(hù)保養(yǎng)
心肺復(fù)蘇（CPR）的培訓(xùn)效果及分析
長(zhǎng)軸液下泵安裝的注意事項(xiàng)：
不銹鋼水箱板材為什么有凸起
天津眾邁氣浮機(jī)處理浮渣的方法
水族養(yǎng)魚蛋白棉樹脂床正確的反洗和再生
一體化污水處理設(shè)備 工藝
廠家教你選防爆手機(jī)
大型數(shù)控鉆床實(shí)現(xiàn)鉆孔自動(dòng)化
小區(qū)居民樓棟燃?xì)庹{(diào)壓箱RTZ-50/0.4Q民用壁掛式天然氣調(diào)壓箱特點(diǎn)
美國PARKER柱塞泵主要特點(diǎn)
混凝土試模 混凝土試模價(jià)格
分享-Deferoxamine-PEG-CY3，Deferoxamine-PEG-FITC，去鐵胺標(biāo)記熒光
label it®核酸標(biāo)記試劑盒為不同核酸類型提供高效、一步到位的直接標(biāo)記。采用非酶標(biāo)記方法和非破壞性的方式將標(biāo)記共價(jià)附著到核酸上，不會(huì)改變核酸的結(jié)構(gòu)或影響下游雜交性能，下游可以直接進(jìn)行體外體內(nèi)示蹤、生物素檢測(cè)、活細(xì)胞定位等。
一、標(biāo)記原理及步驟
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圖.labie it 原理及實(shí)驗(yàn)步驟
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綠色區(qū)域：標(biāo)記（熒光團(tuán)或半抗原）
黃色區(qū)域：促進(jìn)與核酸靜電相互作用的接頭
藍(lán)色區(qū)域：反應(yīng)性的烷基化基團(tuán)
二、產(chǎn)品特點(diǎn)
無損標(biāo)記任何dna或rna模板，應(yīng)用廣泛
圖1、核酸的無損直接標(biāo)記。小鼠總rna用label it®cy®3（b）電泳標(biāo)記，并在agilent rna 6000 nano芯片上與未標(biāo)記的總rna（a）一起分析。標(biāo)記和未標(biāo)記樣品的rna完整性數(shù)（rin）約為9.0。
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可調(diào)標(biāo)記密度–通過最佳標(biāo)記的dna和rna實(shí)現(xiàn)高靈敏度
圖2、靈活的標(biāo)記反應(yīng)條件。通過調(diào)整反應(yīng)中l(wèi)abel it®試劑（mirus bio）的量或在37°c下調(diào)整標(biāo)記反應(yīng)的培養(yǎng)時(shí)間，可以輕松控制標(biāo)記密度。
化學(xué)標(biāo)記減少了酶標(biāo)整合和復(fù)制偏好
成本低，與核酸酶法標(biāo)記相比，每個(gè)反應(yīng)可節(jié)省50%的費(fèi)用
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圖5。質(zhì)粒定位和表達(dá)的間接示蹤。使用transit®-lt1（mirus bio）將label it®tracker -cy®5（mirus生物）標(biāo)記的peyfp nuc質(zhì)粒（藍(lán)色）轉(zhuǎn)染進(jìn)在wan全培養(yǎng)的cos-7細(xì)胞™中。在轉(zhuǎn)染后3、8和20小時(shí)采集圖像。藍(lán)色信號(hào)表示cy®5標(biāo)記質(zhì)粒的細(xì)胞定位，綠色信號(hào)表示細(xì)胞自發(fā)熒光，黃色信號(hào)表示核黃色熒光蛋白（yfp）報(bào)告子的表達(dá)。使用共焦顯微鏡獲取圖像。
圖6、c6細(xì)胞中的sirna追蹤。將c6膠質(zhì)瘤細(xì)胞接種在6孔板中的聚-d-賴氨酸涂層蓋玻片上并孵育過夜。將8µl transit -tko®轉(zhuǎn)染試劑稀釋在200µl無血清培養(yǎng)基和50 nm（孔中的最終濃度）label it®sirna tracker cytm3標(biāo)記的sirna雙鏈體添加到稀釋的transit -tko®轉(zhuǎn)染試劑中以形成復(fù)合物。隨后，將這些復(fù)合物添加到wan全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的45%融合的c6細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染后20小時(shí)在zeiss lsm 510共焦顯微鏡上獲得共焦圖像。
訂閱信息：
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