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MCECs細(xì)胞傳代培養(yǎng)(小鼠心臟內(nèi)皮細(xì)胞)

細(xì)胞:mcecs細(xì)胞
中文名稱:人小鼠心臟內(nèi)皮細(xì)胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:dmem-h培養(yǎng)基 血清:10%fbs(gibco胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% fbs、10% dmso
細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,pbs緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25%yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基ph值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
目的應(yīng)用雙哌達(dá)莫(dpm)、腺苷(ado)與ado拮抗劑(th)治療博萊霉(ble)肺纖維化小鼠,觀察肺、脾等病理變化,探討肺纖維化發(fā)病機理.
方法:
實驗第1天100只小鼠經(jīng)氣管注入ble 8.5 mg*kg-1,隨機分ble、dpm、ado和th四組;
第2天起分別給予ns(100μl*d-1)、dpm、ado和th,劑量均為50mg*kg-1*d-1,共7天;
第4~30天內(nèi)chu死動物,組織化學(xué)法觀察肺內(nèi)纖維變化與脾、胸腺、骨髓病理學(xué)改變.
結(jié)果:
ble組和th組第4~6天脾、胸腺髓質(zhì)與骨髓中許多基質(zhì)細(xì)胞huai死導(dǎo)致組織嚴(yán)重疏松。
ble組第20天后脾與胸腺逐漸weisuo,肺與脾內(nèi)網(wǎng)狀纖維大量增加。
dpm組與ado組第4~6天脾、骨髓壞死基質(zhì)細(xì)胞較少,第30天肺未發(fā)生纖維化,淋巴器官未weisuo.
結(jié)論:
ble能致脾、骨髓等基質(zhì)細(xì)胞大量huai死與嚴(yán)重組織疏松.內(nèi)、外源性ado能輕度減少基質(zhì)細(xì)胞huai死,促進(jìn)淋巴組織與造血組織增生,抑制ble誘導(dǎo)的肺纖維化與淋巴器官weisuo.
關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱

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