維生素是人體生命活動bu ke que shao的營養(yǎng)物質(zhì),它們一般在動物和人體內(nèi)不能合成或合成數(shù)量少,滿足不了動物和人體的需要,必須依靠從食物中攝取。在食物中缺乏任何一種維生素,人和動物都會發(fā)生te you的缺乏癥狀,如缺乏維生素a、b和c時,可分別引起夜盲癥、腳氣病和壞血病等,嚴重時足以致命。維生素含量的高低,是評價農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)的重要指標之一。
維生素廣泛存在于各種生物體中,其種類繁多,化學結(jié)構(gòu)與功能各異。按其溶解性可分為脂溶性(va、vd、ve、vk)和水溶性(vbl、vb2、vb6、vb12、vc)兩大類。
維生素的分析測定是一項比較復雜的工作。其樣品分析的一般程序是:首先用酸、堿或酶分解樣品,使其中的維生素游離出來再用溶劑進行提取,提取后對樣液進行分離提純,最后用適當?shù)姆椒ㄟM行定量等。維生素的前處理方法很多,選用方法時應根據(jù)樣品的品種、類型、待測維生素的性質(zhì)、含量以及干擾物質(zhì)多少等因素來決定。
復雜的前處理過程往往需要智能高效的前處理儀器來進行,detelogy參考gb 5009.82-2016 提供食品中維生素的前處理解決方案。
一、食品中維生素e的測定
1、 植物油脂
稱取2 g油樣于25 ml的棕色容量瓶中,加入0.1g bht,加入10 ml流動相于multivortex多樣品渦旋混合器渦旋振蕩溶解后,用流動相定容至刻度,搖勻。過濾膜,待進樣。
注:流動相:正己烷 [叔丁基甲基醚-四氫呋喃-甲醇混合液(20 1 0.1)]=90 10,臨用前配制。
2 、奶油、黃油
稱取5 g樣品于離心管中,加入0.1 g bht 45℃水浴融化,加入5 g無水硫酸鈉,multivortex多樣品渦旋混合器渦旋1 min,混勻,加入25 ml流動相后multivortex渦旋振蕩提取,離心,將上清液wan quan轉(zhuǎn)移至濃縮瓶中,并將其放入fv32plus全自動高通量智能平行濃縮儀上,于40℃水浴中濃縮至近干。用流動相定容10 ml,混勻。溶液過濾膜后,待測。
3、堅果、豆類、辣椒粉等干基植物樣品
稱取5 g 樣品,用iqse-02/06智能快速溶劑萃取儀提取其中的植物油脂,提取液于flexivap12/24全自動智能平行濃縮儀40℃水浴中氮吹濃縮至干,用10 ml流動相將油脂轉(zhuǎn)移至25 ml容量瓶中,加入0.1g bht,multivortex多樣品渦旋混合器渦旋振蕩溶解后,用流動相定容至刻度,搖勻。過濾膜,待進樣。
iqse-02/06萃取條件
萃取溫度
105℃
萃取壓力
1000 psi
加熱時間
5 min
靜態(tài)時間
10 min
沖洗體積
100%
n2吹掃時間
60 s
萃取溶劑
石油醚
靜態(tài)萃取次數(shù)
3次
注:iqse-02/06智能快速溶劑萃取儀可與flexivap-12/24全自動智能平行濃縮儀無縫銜接。
二、 食品中維生素 d的測定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法
1、皂化
稱取2 g試樣于50 ml具塞離心管中,加入100 μl維生素 d2-d3和維生素d3-d3混合內(nèi)標溶液,(含淀粉樣品需加入0.4 g淀粉酶、10 ml約40℃溫水,60℃避光恒溫振蕩 30 min后,取出冷卻)加入0.4 g 抗壞血酸、6 ml約40℃溫水于multivortex渦旋1 min,加入12 ml乙醇multivortex渦旋混勻,再加入6 ml氫氧化鉀溶液multivortex渦旋混勻后,80℃避光恒溫水浴振蕩30 min(如樣品組織較為緊密,可每隔 5 min~10 min 取出multivortex渦旋0.5 min),取出放入冷水浴降溫。
2、提取
向冷卻后的皂化液中加入20 ml正己烷,multivortex渦旋提取3 min,離心后轉(zhuǎn)移上層清液到50 ml離心管,加入25 ml水,輕微晃動30次,離心后取上層有機相備用。
3、凈化
將樣品提取液置于安裝好硅膠固相萃取柱的ispe-864全自動智能固相萃取儀中進行凈化,收集洗脫液于fv32plus全自動高通量智能平行濃縮儀40℃下氮氣吹干,加入1.0 ml甲醇,multivortex渦旋混勻,過有機濾膜供儀器測定。
ispe-216/864固相萃取條件
步驟
溶劑
用量(ml)
流速(ml/min)
活化
乙酸乙酯
8
2
活化
正己烷
8
2
上樣
樣液
20
2
淋洗
乙酸乙酯:正己烷(5 95)
6
2
洗脫
乙酸乙酯:正己烷(15 85)
6
2
三、食品中維生素a和維生素e的測定
皂化
稱取10 g固體試樣或50 g液體試樣于150 ml平底燒瓶中,固體試樣需加入約30 ml溫水,混勻,(若樣品含淀粉時需加入1.0g淀粉酶, 60℃水浴避光恒溫振蕩30 min后,取出)再加1.0 g抗壞血酸和0.1 g bht,混勻,加入30 ml無水乙醇,加入20 ml氫氧化鉀溶液,混勻后于80℃恒溫水浴震蕩皂化30 min,冷卻。
注:
1、皂化時間一般為30 min,如皂化液冷卻后,液面有浮油,需要加入適量氫氧化鉀溶液,并適當延長皂化時間。
2、使用的所有器皿不得含有氧化性物質(zhì);分液漏斗活塞玻璃表面不得涂油;處理過程應避免紫外光照,盡可能避光操作;提取過程應在通風柜中操作。
提取
將皂化液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,加入50 ml石油醚-yi mi混合液,振蕩萃取5 min,將下層溶液轉(zhuǎn)移至另一分液漏斗中,加入50 ml的混合醚液再次萃取,合并醚層。
洗滌
用約100 ml水洗滌醚層,需重復 3 次,直至將醚層洗至中性,去除下層水相。
濃縮
將洗滌后的醚層wan quan轉(zhuǎn)移至flexivap-12全自動智能平行濃縮儀上,于40℃水浴中氮吹濃縮至近干。用甲醇分次將蒸發(fā)瓶中殘留物溶解并轉(zhuǎn)移至10 ml 容量瓶中,定容至刻度。溶液過有機相濾膜后供高效液相色譜測定。
四 、食品中維生素 d的測定 高效液相色譜法
皂化
稱取10 g固體試樣或 50 g液體樣品于150 ml平底燒瓶中,固體試樣需加入30 ml溫水,加入1.00 ml內(nèi)標使用溶液(如測定維生素d2,用維生素d3作內(nèi)標;如測定維生素d3,用維生素d2作內(nèi)標,含淀粉樣品需加入1g淀粉酶進行酶解),再加入1.0 g抗壞血酸和0.1 g bht混勻。加入30 ml無水乙醇,加入20 ml氫氧化鉀液,邊加邊振搖,混勻后于恒溫磁力攪拌器上80℃回流皂化30 min,皂化后立即用冷水冷卻至室溫。
后續(xù)步驟同食品中維生素a和維生素e的測定方法
detelogy優(yōu)選儀器
multivortex多樣品渦旋混合器
? 高通量,配置多種規(guī)格樣品管
? 高轉(zhuǎn)速,應對各種難溶樣品
? 可預存12種渦旋程序
iqse-06智能快速溶劑萃取儀
? 6個通道并聯(lián)使用,每個通道可獨立啟停
? 萃取池自動密封,運行開始后自動升溫升壓
? 圖形化界面quan fang wei監(jiān)控萃取流程
ispe-864全自動智能固相萃取儀
? 八通道,可批量處理64個樣品
? 采用先進的柱塞桿密封過柱技術,支持串柱功能
? 主機與智能終端一體化設計,無需外接電腦
flexivap-12/24 全自動智能平行濃縮儀
? 實驗過程中可隨時啟停增減樣品
? 氮吹角度自動調(diào)節(jié)(0-90°),先斜吹后直吹
? 各個通道均可獨立控制,自動定量濃縮1 ml或0.5 ml
fv32plus全自動高通量智能平行濃縮儀
? 兼容針追隨式氮吹和渦旋式氮吹針。
? 三面水浴可視窗具備多色照明功能,智能快插排水口。
? 各個通道均可獨立控制,自動定量濃縮1 ml或0.5 ml
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