主要用途
動(dòng)物(羊)精子細(xì)胞凍存液是一種旨在幫助深低溫冷凍環(huán)境下儲(chǔ)存各種羊類動(dòng)物精子細(xì)胞,確保其功能完整性和授精能力的保護(hù)性介質(zhì)和而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種羊類動(dòng)物精子細(xì)胞的凍存處理。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,性能穩(wěn)定,無(wú)病毒和支原體,維護(hù)精子細(xì)胞活力高達(dá)80%以上。
技術(shù)背景
凍存保護(hù)(cryopreservation)是長(zhǎng)期儲(chǔ)藏和保存生物活體材料的基本手段。但是,在深低溫(-80℃以下)凍存過(guò)程中活體細(xì)胞將受到物理或化學(xué)性傷害諸如冰結(jié)晶體的形成、滲透壓的變化以及化學(xué)物毒性等,尤其是致命性的活體細(xì)胞活內(nèi)冰產(chǎn)生,所導(dǎo)致?tīng)垦雍涂s水等物理性損傷。作為凍存保護(hù)劑之一的甘油(glycerol)被證實(shí)能夠阻止冰晶體的發(fā)生。使用二糖類分子和蛋黃液(egg yolk),可以維持精子細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能完整性、運(yùn)動(dòng)能力、存活率、穿透力、人工授精能力和繁殖能力(fecundity)等。
產(chǎn)品內(nèi)容
凍存液(reagent a) 20毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
保存方式
保存凍存液(reagent a)在-20℃的冰箱里,有效保證6月
用戶自備
2毫升凍存管:用于精子細(xì)胞冷凍儲(chǔ)藏的容器
液氮罐:用于精子細(xì)胞深凍儲(chǔ)存
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒里的凍存液(reagent a)從-20℃的冰箱里取出,置于室溫下預(yù)熱。然后進(jìn)行下列操作。
1.準(zhǔn)備好新鮮收集(1小時(shí)內(nèi))的精液到15毫升錐形離心管
2.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育30分鐘
3.移取1毫升(10 x 106/毫升)到2毫升凍存管
4.一滴一滴加入1毫升凍存液(reagent a),混勻
5.室溫下靜置10分鐘
6.轉(zhuǎn)移到降溫控制冰箱,降溫速度為1度/分鐘
7.直至降溫到-80℃
8.即刻轉(zhuǎn)移到液氮罐里長(zhǎng)期保存
注意事項(xiàng)
1.本產(chǎn)品為20毫升規(guī)格
2.所有凍存操作和使用工具均須在嚴(yán)格無(wú)菌狀態(tài)下進(jìn)行
3.操作時(shí),避免污染母液
4.可以按照1:1至1:3比例加入凍存液(reagent a),例如1毫升精子細(xì)胞懸液加入1至3毫升凍存液(reagent a)
5.解凍的基本原則是快速放進(jìn)37℃恒溫水槽瞬時(shí)解凍,這樣可以確保細(xì)胞的存活質(zhì)量
6.本公司提供系列精子細(xì)胞凍存試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)噬菌體(bacteriophage)
3.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)支原體(mycoplasmas)
4.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)細(xì)菌和真菌
5.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)病毒(akabane,blue tongue,bovine adenovirus fa,bovine parovirus fa,bovine respiratory syncytial virus fa, bovine viral diarrhea virus fa, reovirus fa, rabies virus fa等)
6.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定符合美國(guó)體外組織培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)的規(guī)定:化學(xué)成分、滲透壓、ph、內(nèi)毒素、存活能力等
7.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定維護(hù)精子細(xì)胞活力高達(dá)80%以上
關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 恒溫水槽
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